有哪些病毒学研究常用方法? 细胞病变效应(cytopathic effect,CPE):由病毒增殖引起的细胞改变称细胞病变效应。 不同种类病毒可引起不同细胞病变效应。如: ①细胞圆缩、分散、溶解,如肠道病毒、鼻病毒、披膜病毒、痘病毒等; ②细胞融合成多核巨细胞,如疱疹病毒、副粘病毒、呼吸道合胞病毒; ③细胞肿胀、颗粒增多、病变细胞聚集成葡萄状,如腺病毒; ④胞质出现空泡,如SV40细胞; ⑤细胞浆或核内出现嗜酸性或嗜碱性包涵体,一至数个不等; ⑥轻微病变,如正粘病毒、狂犬病毒、冠状病毒和逆转录病毒等; ⑦培养液pH的变化。探普生物独有的实验和分析流程,可兼容高复杂度,低浓度的病毒核酸。DNA病毒序列测序突变分析服务
需要对病毒的全基因组进行测序的应用场景:在探普生物长时间运行过程中,我们接触到的对病毒的全基因组进行测序项目有比较丰富的应用场景。先,从事基因进化/疫苗/药品/抗体研制方向的研究的研究者一定会用到测序。这种场景一般是用密集的sanger测序监测某几个关键基因,搭载一定频率的全基因组测序。这样的组合省时省力省经费,同时能达到研究目的。此外,有的单位需要对传染病的病原进行流行病学监测和研究,如疾控/疫控中心、医院的传染病科室以及一些高校和研究所的相应课题组,可能需要对病毒的全基因组进行测序以后,结合其他上下游的研究数据,达到研究或者监测疫病的目的。
RNA病毒二代测序分析探普生物优化了自有数据库。
深度测序技术对社会具有的影响:深度测序技术促进了基因检测的普及,对社会的影响第1个方面反映在商业模式的变化,即医学检验和健康管理方面的平民化、个性化趋势的形成。社会生活受到深度测序技术影响的第二个方面是基因测序的普遍应用。例如,基因关联将人与人通过遗传学关联起来,人们可以对基因进行分析判定亲缘关系,基因测定甚至可以帮助判定婚姻(包括遗传病等方面的)匹配度。公安机关可以通过基因比对,锁定犯罪嫌疑人、寻找丢散的儿童和亲人。甚至有报道表明,测定20多个基因就可以将人脸重构。基因检测的应用将随着基因-表型的关联得到更普遍的应用,对社会生活的方方面面起到重要作用。
二代测序应用的患者类型的推荐:共识明确指出了二代测序应用的患者类型及使用的时机的意见:对于神经系统急性传染/血流传染/呼吸道传染患者,3天是二代测序使用的时机,在传统方法(常规的生化检查和培养)3天未报阳性且经验性调整无效时,强烈推荐二代测序检测;对疑似病毒传染患者,包括:疑似神经系统病毒传染和病毒性肺炎且病情持续进展的患者,若完善传统PCR检测后依然未获得明确的病原学证据时,强烈推荐二代测序检测。对于疑似局灶性传染患者完成常规的生物化学、培养或PCR检测后,若未能获取病原学诊断结果,推荐将二代测序作为检测方法。而对于怀疑继发性血流传染患者:在原发传染灶的病原学检测为阴性或因各种因素无法送检合适标本的情况下,可考虑将血标本的二代测序检测作为二线检测。想要通过高通量测序获得病毒全序列,需要经历:核酸纯化-文库构建-生物信息学分析这三大基本流程.
对病毒的全基因组进行测序时,生物信息学分析工作的进行:生存环境和状态决定了对病毒的全基因组进行测序的下机数据一般都伴随大量的宿主和其他微生物的数据。探普生物基于该特点,优化了自有数据库,搭载了专门用的的生物信息学分析流程,可处理复杂背景下的目标物种序列。探普生物基于该特点,优化了自有数据库,专门搭载了生物信息学分析流程,可处理复杂背景下的目标物种序列。生物信息学流程主要包括对非目标数据进行去除以及对目标序列进行筛选,高质量高完整度的序列拼接以及后续的高级分析,如SNP分析,进化分析,耐药位点分析等。在探普的专门用的流程下,可以获得完整性很高的基因组序列。
测序覆盖度是反映测序随机性的指标之一。安徽高通量测序进化分析排行
病毒全基因组测序具有的特点:独有的一定定量技术,实现病原定量分析。DNA病毒序列测序突变分析服务
RNA/DNA病毒测序对病毒基因组进行测序是快速了解病毒突变、毒力变化、病毒型别的有效方法。可以根据病毒基因组大小和类型,采用PCR、RT-PCR或shotgun测序法,对病毒的部分或全长基因组测序,结果准确可靠。服务标准:测出的序列准确性在99%以上;病毒全基因组测序测出序列在总基因组大小95%以上;数小于5个;Shotgun测序的覆盖度在6以上;PCR和RT-PCR测序达到2。服务说明:1、提供病毒DNA或RNA作为样品。2、PCR测序的DNA样品总量大于5μg,浓度大于20ng/μl。DNA无降解。3、Shotgun测序法的DNA样品总量大于20μg,浓度大于100ng/μl。DNA无降解。4、用RT-PCR和PCR测序法在提供参考序列时需同时提交样品部分序列与参考序列的比对文件,确保同源性在95%以上。
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